免疫治疗后CAR-T细胞是否仍然存在于体内，有证据可以证明吗？

之前，我们都是在人体外观察免疫细胞攻击其他细胞，但是，新技术可清晰追踪患者体内细胞！而且还能观测到“将瞄准肿瘤细胞的特异性靶点插入T细胞”中的CAR-T细胞。

超高清显微镜拍摄的免疫细胞攻击细菌、癌细胞

来自宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院(Perelman School of Medicine)的研究人员发现的这种能追踪体内T细胞的新方法，是通过向T细胞插入分子标记物的基因片段，从而可以在PET/CT检测中清楚的观察体内的CAR-T细胞。

对于肿瘤组织内部的CAR-T细胞，甚至能灵敏的观测到每立方毫米内有11000个细胞！

回顾CAR-T细胞疗法：

CAR-T，即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。在急性白血病和非霍奇金淋巴瘤的治疗上有着显著的疗效，被认为是最有前景的肿瘤治疗方式之一。

CAR-T有CAR和T两部分 。主体T：它就是我们体内的免疫T细胞，用来攻击身体里的“非正常细胞”。为了不错杀，T细胞只有被激活后才会发动攻击。想要激活T，有两种情况：

一种情况是，T细胞通过“介绍人”（即：抗原递呈细胞APC）与非正常细胞表面的MHC接触，就可以知道这个细胞已经不是正常细胞。从而发动攻击。

另一种情况是，T细胞与细胞分泌的相应抗原配体结合。配体有两类，由非正常细胞发出的刺激物可以“激怒”T细胞并使其发动进攻，而好细胞发出的抑制物如PD-1则可以让T细胞别冲动。针对T细胞的这两种激活信号，熟悉环境的癌细胞自有应对之法：首先，狡猾的癌细胞掩盖住会暴露出身份的MHC。此外，许多癌细胞可以分泌类似抑制剂PD-1（正常细胞分泌）的PD-L1来抑制T细胞激活。

所以，仅靠T细胞，打败癌很难。于是，科学家们想办法，如何让T细胞变得更强？

他们将CAR嵌在T细胞的表面组成CAR-T。CAR帮T细胞选取癌细胞表面的特征蛋白作为靶点，相当于让T细胞不受MHC的限制，而是通过另外的渠道进行辨别，然后发动自身的免疫细胞清除癌细胞。

看上去神乎其神的疗法，没有“眼见为实”，也许许多人心里还是对CAR-T疗法抱有怀疑，这些CAR-T细胞回输到人体后都去了哪里呢？如何确定CAR-T是否全部来到了肿瘤组织周围呢？在治疗后的几个星期、几个月甚至几年后，这些CAR-T细胞还在我们体内吗？这些都是值得我们最关注的问题。

想要验证免疫治疗后这些细胞是否仍然存在于体内呢？目前最主流的技术是定期进行肿瘤组织活检或抽血。通过手术切除病理组织再检测，定期肿瘤组织活检给患者带来了不小的身体创伤。

现在佩雷尔曼医学院的科研人员发现的来自细菌的大肠杆菌二氢叶酸还原酶(eDHFR)，将它的DNA通过基因编辑技术插入至T细胞体内，随着改造后的CAR-T细胞一同回输至患者体内。

在本次实验中，研究人员从抗生素甲氧苄啶中提取出了造影剂。这种造影剂对细菌酶具有高度的亲和力，但对人体酶却是低亲和力。（*患者在进行PET/CT检测时都需要喝下造影剂，不同的造影剂能够追踪体内不同的细胞并聚集在其周围。当经过PET/CT扫描时，造影剂将展现出五颜六色的人体图像。）因此，当患者服用甲氧苄啶造影剂时，这些小分子将聚集在含有eDHFR酶的CAR-T细胞周围，将其与其他细胞区分开。

在动物实验中，研究人员将eDHFR CAR-T细胞插入小鼠体内，并注射甲氧苄啶造影剂。通过PET/CT扫描可以实时追踪CAR-T细胞在体内的数量和位置。小鼠的PET/CT图像显示，在注射的7天后，CAR-T细胞开始在脾脏内聚集，而在13天后，肿瘤组织中大量出现CAR-T细胞。

更加令人惊讶的是，研究人员发现这种技术对肿瘤内部的CAR-T细胞尤其敏感，在PET/CT的扫描下，能看到肿瘤内部每平方毫米内有11000个CD8+肿瘤细胞。

接下来，研究人员希望能够在人体中开展临床试验，为接受免疫治疗的癌症患者测试这项新技术。当这项技术能够成熟应用在癌症患者中，医生就可以通过实时观测患者体内的CAR-T细胞，来判断免疫治疗是否起效，而科研人员可以通过这项技术，更直观准确的分析了解免疫治疗的作用机制，开发出更安全有效的癌症免疫疗法。